IF750-Tyramid

Tyramidsignalforsterkning (TSA) er en type enzymatisk deteksjonsmetode som bruker HRP til å utføre in-situ merking av målantigener med høy tetthet og kan brukes til signalamplifisering av IF/IHC. Hovedprinsippene for TSA-teknologi: I nærvær av hydrogenperoksid H2O2, kan pepperrotperoksidase HRP katalysere tyramin som et svært aktivt kortvarig mellomprodukt. I løpet av kort tid kan mellomproduktet binde seg kovalent til den elektronrike overflaten av omkringliggende proteiner for å danne tyraminkompleks, og et stort antall rike klynger som "øy" er integrert med enzymet som sentrum. En stor mengde luciferin ble avsatt på antigen-antistoff-bindingssetet for å oppnå signalamplifikasjon.

TSA-teknikk kan brukes til å oppdage mål med lav overflod som ikke kan oppdages med konvensjonelle metoder. Signalforsterkningsteknologi basert på tyramin kan gi ekstremt høy følsomhet og oppdage svært små mengder målantigener. TSA-teknologi reduserer mengden antistoffer kraftig og sparer antistoffer, og kan brukes i kombinasjon med konvensjonelle fargemetoder for flerfargeavbildning, eller to eller flere tyraminreaksjoner kan utføres sekvensielt for å merke forskjellige mål på en prøve, slik at flere fluorescensfarginger kan oppnås med gjentatt merking av forskjellige fluorescerende tyraminer

Oppbevarings- og håndteringsforhold

Våtisposer for transport, lagres ved -20 grader i 12 måneder.

Note:

1. Etter smelting ved romtemperatur sentrifugeres røret en kort stund før bruk.

2. Sammenlignet med fluorescerende sekundært antistoff har TSA-settet høyere følsomhet og sterkere signal. Derfor bør konsentrasjonen av primært antistoff reduseres, og generelt utvides 5-10 ganger på grunnlag av fortynningsforholdet anbefalt i antistoffmanualen for å redusere bakgrunnsfluorescensen forårsaket av uspesifikk binding. Det anbefales å sette en motstandsgradientkonsentrasjon for best resultat.

3. Hvis bakgrunnsfluorescensen er sterk, anbefales det å øke quenching-trinnet for vevsautofluorescens.

4. Det anbefalte fortynningsforholdet for fluorescerende tyramid er 1:500, og fortynningsforholdet kan justeres i henhold til de eksperimentelle resultatene (det anbefalte fortynningsforholdet er 1:200-1:1000).

5. Fortynningsmiddel bør tilberedes av deg selv, 1×TBST (G0004 anbefalt) som inneholder 0,003 % H2O2. 1×TBST (G0004 anbefalt) 100 mL, tilsett 100 μL 3 % H2O2, bland godt. Fortynningsmidlet er lett å mislykkes, så det anbefales å bruke det nå.

6. Hvis multippel fluorescerende merking utføres, anbefales det å inkubere polyklonale antistoffer først og deretter monoklonale antistoffer. Antistoffet som tilsvarer målproteinet med høy mengde inkuberes først, og deretter inkuberes antistoffet som tilsvarer målproteinet med lav mengde. For spesifikke operasjonstrinn, se vår TSAPLus fluorescerende multi-label (1-7 etiketter, 2-8 fargefluorescens) fargesett (G1226, G1236, G1255, G1256, G1257, G1259).

7. Bruk laboratoriefrakk og engangshansker under drift.

8. I henhold til lyskildekartet til fluorescensbildesystemet, kan forskjellige fluorescerende fargestoffkombinasjoner velges for å utføre TSA-fluorescens-multimerking.

Kun for forskningsbruk!

Populære tags: if750-tyramide, Kina if750-tyramidprodusenter, leverandører, fabrikk