SDS-PAGE Gel Preparation Kit

 

Produktnavn	Kat.nr.	Spes.
SDS-PAGE Gel Preparation Kit	G2003-50T	50 T

 

 

SDS-PAGE gelprepareringssettet inneholder alle reagenser som kreves for gelpreparering. Brukere trenger bare å forberede en liten mengde rent vann og utstyr for å lage gel (limfremstillingsbase, glassplate, kam, etc.), og følge instruksjonene for å produsere den nødvendige gelen. Dette settet kan forberede minst 50 geler i vanlig størrelse.

 

 

Skip med våt is; Modifisert koagulant lagret ved -20 grad, andre lagret ved 2-8 grad vekk fra lys, gyldig i 12 måneder.

 

 

Komponentnummer	Komponent	G2003-50T
G2003-1	1,5 M Tris-HCl (pH 8,8)	100 ml
G2003-2	30 % akrylamid-bisakrylamid (29:1)	100 ml
G2003-3	1.0 M Tris-HCl(pH 6,8)	20 ml
G2003-4	10 % SDS	5 ml
G2003-5	PAGE gelstørkningskatalysator	1 ml
G5036-5ML	Modifisert koagulant	1 mL×5
Håndbok		1 stk

 

 

1. I henhold til molekylvekten til målproteinet og den valgte elektroforesebufferen, velg passende konsentrasjon av SDS-PAGE-separasjonsgel, som vist i tabellen nedenfor:

SDS-PAGE Separation Gel Konsentrasjoner	Optimalt separasjonsområde (kDa) (Tris-Glycine elektroforesebuffer, G2018)	Optimalt separasjonsområde (kDa) (SWE Fast High Resolution Electrophoresis Buffer, G2081)
6%	50-300	15-300
8%	30-130	10-250
10%	20-100	5-150
12%	10-60	3-100
15%	<40	<60

 

2. I henhold til molekylvekten til målproteinet ble konsentrasjonen av separasjonsgelen valgt. Ved å ta den vanlige spesifikasjonen på 8,3 cm × 7,3 cm gelplate (enkeltblokk) som et eksempel, kan gelprepareringsløsningen tilberedes i henhold til følgende tabell:

Separation Gel Konsentrasjoner (%)	6%			8%			10%			12%			15%
Glassplatetykkelse	0.75 mm	1.0 mm	1,5 mm	0.75 mm	1.0 mm	1,5 mm	0.75 mm	1.0 mm	1,5 mm	0.75 mm	1.0 mm	1,5 mm	0.75 mm	1.0 mm	1,5 mm
Totalt volum lim nødvendig*(ml)	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0
H2O(ml)	2.1	3.18	4.24	1.85	2.78	3.7	1.59	2.38	3.17	1.32	1.98	2.64	0.92	1.38	1.84
30 % akrylamid-bisakrylamid (29:1) (ml)	0.8	1.2	1.6	1.07	1.6	2.14	1.33	2.0	2.67	1.6	2.4	3.2	2.0	3.0	4.0
1,5 M Tris-HCl (pH 8,8) (mL)	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	2.0
10 % SDS(μL)	40	60	80	40	60	80	40	60	80	40	60	80	40	60	80
Modifisert koagulant (μL)	40	60	80	40	60	80	40	60	80	40	60	80	40	60	80
PAGE gelstørkningskatalysator (μL)	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0

* Det totale volumet av gelforberedelsesløsningen inkluderer ikke volumet av PAGE-gelstørkningskatalysator

 

3. Forberedelse av stablegel kan referere til følgende tabell:

Stablegelkonsentrasjoner (%)	5%
H2O(ml)	1.93	2.95	3.86	5.79
30 % akrylamid-bisakrylamid (29:1) (ml)	0.5	0.75	1.0	1.5
1.0M Tris-HCl(pH 6,8)(mL)	0.5	0.75	1.0	1.5
10 % SDS(μL)	40	60	80	120
Modifisert koagulant (μL)	18	27	36	54
PAGE gelstørkningskatalysator (μL)	4	6	8	12
Totalt volum*(ml)	3	4.5	6.0	9.0

* Det totale volumet inkluderer ikke PAGE-gelstørkningskatalysatorvolumet.

 

4. Anbefalte elektroforetiske forhold:

a) Bruk av SWE hurtig høyoppløselig elektroforesebuffer (G2081) for elektroforese: 200-250 V konstant trykk, 25-35 min for å fullføre elektroforesen;

b) Tris-Glycine-elektroforesebuffer (G2018) brukes til elektroforese: spenningen til den øvre gelen er satt til 90 V, og elektroforese varte i ca. 30 minutter (markør gikk inn i separasjonsgelen); Justeringsspenningen til den nedre gelen er 150-180 V, ca. 60-90 min (kan justeres i henhold til den faktiske situasjonen).

 

 

1. Alle reagenser bør varmes opp til romtemperatur før bruk.

2. Sammenlignet med ammoniumpersulfat (AP) har den forbedrede koagulanten bedre stabilitet. Ta ut en for bruk og oppbevar den ved 4 grader etter bruk for påfølgende rutinebruk, som kan lagres i seks måneder. Hvis den ikke brukes på lang tid, oppbevar den ved -20 grader for å unngå gjentatt frysing og tining.

3. Tricingel anbefales for proteinseparasjon mindre enn 10 kDa; akrylamidgeler er kanskje ikke tilstrekkelige for separering.

4. Temperatur har en betydelig innvirkning på geleringstiden til limet. For å sikre jevn eksperimentfremgang resulterer generelt lavere temperaturer i lengre geleringstider, og det kan være nødvendig å øke dosen av den modifiserte koagulanten tilsvarende. På den annen side fører høyere temperaturer til raskere geldannelse, slik at dosen av det modifiserte koaguleringsmidlet kan reduseres tilsvarende.

5. Gelen trenger tilstrekkelig størkningstid, og det anbefales at gelen er fullstendig klargjort og stående for å sikre at den gelerer grundig.

6. Når temperaturen er lav, har 10 % SDS-løsning krystallisasjonsutfelling, og kan brukes etter omsmelting ved 37 grader.

7. Hvis du trenger et raskt gelprepareringssett med reagenser, kan du kjøpe andre produkter fra selskapet vårt, for eksempel SDS-PAGE Fast Acrylamide Kit (G2037), eller superrask fargegelprepareringssettserie (G2041 / G2042 / G2043 G2044 / G2045 / G2060 / G2061 / G2062 / G2063 / G2064), og høy oppløsning ultrarask fargegelpreparasjonssett-serie (G2066/G2067/G2068, G2071/G2072/G2073), kan møte forskjellige eksperimentelle behov.

8. For din sikkerhet og helse, vennligst bruk laboratoriefrakk og engangshansker under drift.

 

Kun for forskningsbruk!

 

 

Populære tags: sds-side gel forberedelsessett, Kina sds-side gel forberedelsessett produsenter, leverandører, fabrikk